Сергий трудился денно и нощно, умерщвляя свою плоть бдением, постом и многоразличными трудами. Слава о нем начала распространяться повсюду, и из окрестных городов стекались к хижине люди ради спасения. Сергий же выстроил небольшую деревянную Троицкую церковь. Позднее на дары архимандрита Симона из Смоленска была воздвигнута большая каменная, а монастырь расширен – так повествует нам о зарождении Лавры святитель Димитрий Ростовский в «Книге житий святых».
На протяжении столетий Троице-Сергиева лавра является одной из самых почитаемых общерусских святынь, крупнейшим центром просвещения и культуры. Здесь были сосредоточены переписка книг, иконописное дело и художественные ремесла, велось летописание. В стенах обители подвизался сонм подвижников Русской Православной Церкви и в их числе преподобные Никон Радонежский, Максим Грек, духовные писатели преподобный Епифаний Премудрый и Пахомий Логофет, художники-иконописцы преподобный Андрей Рублев и Даниил Черный, архитекторы И.Ф. Мичурин и Д.В. Ухтомский, мастер-резчик Амвросий.
Шесть лет был игуменом Свято-Троице-Сергиевого монастыря преподобный Савва Сторожевский (основатель почитаемого монастыря под Звенигородом). Священноархимандритами Лавры были святители Московские Филарет (Дроздов; ум. 1867) и Иннокентий (Вениаминов; ум. 1879), а также священно-мученик митрополит Владимир (Богоявленский; ум. 1918).
В Лавре веками собиралась уникальная библиотека рукописных и старопечатных книг. Постриженниками Лавры основаны и духовно обустроены сотни русских монастырей.
За свою долгую историю Троицкий монастырь неоднократно подвергался нападениям неприятелей. В 1608–1610 годах обитель выдержала осаду тридцатитысячного войска польско-литовских интервентов (осажденных в самом монастыре насчитывалось около трех тысяч). Беспримерная по мужеству оборона Троицкого монастыря ознаменовалась чудесными явлениями преподобного Сергия Радонежского и других угодников Божиих, укреплявших дух героических защитников православной твердыни.
В 1744 году монастырь получил почетное наименование Лавры. Славный период в истории Лавры связан с именем митрополита Московского Платона (Левшина; ум. 1812).